Painel Leucemia Linfocítica Crônica - LLC

Com a análise FISH e um painel padrão de sondas FISH, alterações genéticas podem ser detectadas em aproximadamente 80% dos pacientes com LLC.

As anormalidades cromossômicas mais comuns são a deleção 13q, seguida pela trissomia 12 e deleção 11q (Döhner et al. 2000, Hallek et al. 2008). A deleção 6q e a deleção 17p são observadas com menos frequência.

A análise FISH é importante para a avaliação prognóstica de terapias padrão e mais modernas.

Alterações avaliadas pelo painel:

• deleção ATM quando > 5.6% das células apresentarem apenas um sinal correspondentes à região 11q22.3;
• trissomia 12 quando > 5.0% das células com três sinais correspondentes ao centrômero do 12;
• deleção RB1 quando > 5.6% das células apresentarem apenas um sinal correspondente à região D13S31-D13S25;
• monossomia 17 quando > 6.2% das células apresentarem apenas um sinal correspondente à região D17Z1 e 17p13.1;
• deleção MYB quando > 4.51% das células apresentarem um sinal correspondente à região 6q23.3.
• IGH quando > 4.4% de células com sinais anômalos.
• deleção TP53: quando > 6,2% das células apresentarem sinais anômalos.
• Rearranjo IGH/CCND1: quando > 6,8% das células apresentarem sinais anômalos.
• Rearranjo IGH/BCL2: quando > 6,2% das células apresentarem sinais anômalos.

Döhner H et al. Genomic aberrations and survival in chronic lymphocytic leukemia. NEJM 2000;343(26):1910-1916.Goh AM et al. The role of mutant p53 in human cancer. J Pathol 2011;223(2):116-126.

Hallek M et al. Guidelines for the diagnosis and treatment of chronic lymphocytic leukemia: a report from the International Workshop on Chronic Lymphocytic Leukemia updating the National Cancer Institute-Working Group 1996 guidelines. Blood 2008 ;111(12):5446-5456.

Painel Mieloma Múltiplo

A análise FISH tem um valor especial no mieloma múltiplo. Após o enriquecimento por triagem de células ativadas magnéticas (MACS) para células CD138+, um nível de pureza de células plasmáticas de quase 80% é alcançado mesmo em MGUS, mesmo que o nível de infiltração na medula óssea nativa seja muito menor. Devido ao enriquecimento de células CD138+, alterações cromossômicas podem ser detectadas por FISH em 88-97% de todos os mielomas múltiplos, algumas com grande relevância prognóstica.

Para o diagnóstico citogenético, o International Myeloma Working Group recomenda pelo menos a realização de análises FISH para a detecção da deleção 17p, bem como das translocações t(4;14) e t(14;16). As análises para a detecção de ganhos 1q e deleções 1p, bem como t(14;20) e t(11;14), são uma extensão útil para a estratificação de risco.

Alterações avaliadas pelo painel:

• CDKN2C quando deleção > 5,7% e CKS1B quando duplicação > 5,7% de células com sinais anômalos.
• ATM quando deleção > 5,6% de células com sinais anômalos.
• RB1 quando deleção > 5,6% de células com sinais anômalos.
• TP53 quando deleção > 6,2% e monossomia 17 quando > 6,2% de células com sinais anômalos.
• MYB quando deleção > 4,5% de células com sinais anômalos.
• IGH/FGFR3 quando > 6,2% de células com sinais anômalos.
• IGH/CCND1 quando > 6,8% de células com sinais anômalos.
• IGH/MAF quando > 6,2% de células com sinais anômalos.
• IGH/MAFB quando > 6,2% de células com sinais anômalos.

Caers J et al. European Myeloma Network recommendations on tools for the diagnosis and monitoring of multiple myeloma: what to use and when. Haematologica 2018;103(11):1772-1784.

Painel Deleção 17p

A pesquisa da del(17p13) compreende a detecção da principal deleção no gene P53 e sua pesquisa é sempre recomendada pelo critério do iwCLL de 2018, em casos de LLC elegíveis ao tratamento.

Hallek M, iwCLL guidelines for diagnosis, indications for treatment, response assessment, and supportive management of CLL. Blood, 2018.

Painel  LMA

O Painel FISH para Síndromes Mielodisplásicas/Leucemia Mieloide Aguda identifica as principais alterações genéticas envolvidas nesses distúrbios hematológicos. Ele avalia deleções, duplicações e translocações.

EGR1 [Del. 5q]; RELN [Del. 7q]; 

AML1/ETO t(8,21); 

KMT2A Break [11q23.3]; 

PML/RARA t(15,17); 

CBFB/MYH11 [Inv.16]

Painel Linfoma

O Painel FISH para Linfomas identifica as principais alterações genéticas envolvidas nesses distúrbios hematológicos, avaliando deleções, duplicações e translocações. Ele inclui os genes BCL6, C-MYC, IGH e BCL2.

]BCL6 Break [3q27]; 

C-MYC Break [8q24]; 

IGH Break [14q32.3]; 

BCL2 Break [18q21.33]

Painel SMD

O FISH em Síndrome Mielodisplasica pode ser usado para rastrear as alterações genéticas mais comuns quando a análise cromossômica não pode ser realizada com sucesso. Além disso, os resultados da análise cromossômica clássica podem ser confirmados por FISH. FISH também permite a quantificação do clone aberrante em material nativo e, portanto, serve como um marcador de progressão. Como em alguns pacientes com SMD o clone aberrante é detectável exclusivamente na medula óssea, a medula óssea é o material ideal para FISH. 

EGR1 - Deleção Cromossomo 5

RELN - Deleção Cromossomo 7

Trissomia Cromossomo 8

MLL - Breakapart Cromossomo 11 (11q23.3)

PTPRT - Deleção Cromossomo 20